Система пробоподготовки для криоэлектронной микроскопии Thermo Fisher Vitrobot
Система пробоподготовки для криоэлектронной микроскопии.
Новый Vitrobot™ Mark IV - уникальный прибор для пробоподготовки в области клеточной и структурной биологии. Он также находит применение в пищевой и фармацевтической промышленности, нанотехнологических приложениях - везде, где существует необходимость изучения структуры в коллоидных растворах.
Фундаментальные исследования в клеточной и структурной биологии все больше фокусируются на выявлении механизмов взаимодействия на макромолекулярном уровне. Крио-ЭМ позволяет ученым получить эту информацию путем трехмерной визуализации макромолекулярных структур в нативном состоянии. Vitrobot полностью автоматизирует процесс витрификации, что делает его простым, быстрым и воспроизводимым. А это первый и очень важный шаг на пути к изображениям высокого разрешения и надежным воспроизводимым результатам.
Рабочие параметры:
- Рабочая температура 4–60°C (при температуре окружающей среды в пределах 18–25°C);
- Пельтье контролируемое охлаждение/нагревание;
- Поддерживает относительную влажность на уровне 100%;
- Увлажнение, контролируемое ультразвуком.
Подача образца:
- Небольшой объем образца можно загрузить пипеткой через боковые порты, расположенные слева и справа;
- Время подачи и ожидания (между подачей и блоттингом) контролируются ПО и могут быть заданы пользователем;
- Точный временной контроль разных приложений, процедур блоттинга и витрификации позволяет производить анализ взаимодействий между отдельными компонентами.
Блоттинг:
- Остаток жидкости снимается с сетки посредством блоттинга с фильтровальной бумагой на вращающихся амбушюрах;
- Количество циклов блоттинга (максимум 16 раз для одной сетки) и их продолжительность контролируются посредством ПО и могут быть заданы пользователем;
- Продольное позиционирование сетки («blot offset») и время ожидания между блоттингом и витрификацией («drain time») определяются пользователем.
Витрификация:
- Автоматический контроль затвора обеспечивает плавную подачу сетки в охлаждающий агент (жидкий этан или пропан). Контейнер с охлаждающим агентом поднимается близко к затвору для обеспечения оптимальных условий витрификации;
- Синхронное опускание контейнера и держателя сетки позволяет сохранять сетку погруженной в охлаждающий агент и минимизирует риск контаминации до подачи образца в коробку или криодержатель;
- Контейнер с охлаждающим агентом содержит кольцо для предотвращения контаминации;
- Перенос сетки из контейнера в коробку или держатель в жидком азоте полуавтоматический.
В процессе витрификации образец замораживается так быстро, что молекулы воды не успевают закристаллизоваться, формируя таким образом аморфный лед, при этом практически не повреждая структуру образца. Vitrobot Mark IV, четвертое поколение прибора, дает точный и при этом гибкий контроль над всеми критическими параметрами процесса заморозки. Закрытая рабочая камера дает точный контроль за параметрами окружающей среды и предотвращает нежелательное охлаждение и артефакты концентрации, которые обычно возникают при использовании методов заморозки в открытом пространстве. Контейнер для заморозки оборудован устройством, препятствующим контаминации. Vitrobot Mark IV может увеличить скорость и качество пробоподготовки в любых приложениях, где существует необходимость изучения структуры в коллоидных растворах.