Система конфокальной / двухфотонной микроскопии IVM-CM3

IVM-CM3 — универсальная система конфокальной / двухфотонной интравитальной микроскопии, оптимизированная для экспериментов по визуализации in vivo.



IVM-CM3 — это прибор для интравитальной микроскопии формата «Все в одном». Он может фокусироваться на желаемой длине волны с помощью перестраиваемого блока двухфотонного лазера для длин волн в диапазоне от 690 нм до 1050 нм. IVM-CM3 сочетает в себе преимущества конфокальной и двухфотонной микроскопии, предоставляя бесконечные возможности для трехмерного изображения живых клеток вблизи кожи или в глубине опухоли у мелких животных.

Особенности:

  • Полностью интегрированная система для визуализации in vivo (например, мониторинг и гомеостатическая регуляция жизнеспособности животных);
  • Сверхскоростная съемка (макс. 100 кадров в секунду — 512x512 пикселей);
  • 4D компенсация движения животных (X, Y, Z и время);
  • Настройка длины волны лазера для оптимального двухфотонного возбуждения широкого спектра флуоресцентных агентов;
  • Более глубокая визуализация тканей с помощью более длинноволновой системы фемтосекундного ИК-лазера;
  • Автоматический переход одним щелчком мыши между конфокальным и двухфотонным режимами визуализации;
  • Возможность двухрежимной визуализации IVM-C (конфокальная) / IVM-M (двухфотонная).

Источники:

  • Типы лазеров: конфокальный лазерный блок и перестраиваемый двухфотонный Ti:Sapphire лазер;
  • Длины волн конфокального блока: 405 нм (20 мВт), 488 нм (20 мВт), 561 нм (20 мВт), 640 нм (20 мВт);
  • Длины волн двухфотонного лазера: 690 — 1,050 нм.

Детектор:

  • Типы детекторов: конфокальный и двухфотонный детектор; 
  • Длины волн конфокального детектора: 185 — 900 нм (DAPI, CFP, GFP, YFP, RFP, Cy5, Cy5.5 и т.д.);
  • 4 сверхширокополосных ФЭУ с высоким SNR (от УФ до ближнего ИК, сверхвысокая чувствительность, низкий темновой ток);
  • Переменный диаметр пинхола: 25 — 2,000 мкм (16 шагов);
  • Длина волны двухфотонного детектора: 185 — 760 нм (DAPI, CFP, GFP, YFP, RFP, Cy5, Cy5.5 и т.д.);
  • 4 ФЭУ с высокой квантовой эффективностью (от УФ до ближнего ИК, сверхвысокая чувствительность, низкий темновой ток);
  • 2 или 6 эмиссионных фильтров могут быть установлены на каждый из четырех детекторов.

Сканер:

  • Полигональное зеркало: быстрое аксиальное сканирование, максимально 66 кГц;
  • Гальванический сканер: медленное аксиальное сканирование, максимально 200 мкс/шаг).

Объективы:

  • До 5 объективов (1X — 100X) могут быть установлены на моторизованную турель;
  • Совместимость с коммерческими объективами.

FOV: 

  • От 100 x 100 мкм ² до 10 x 10 мм².

Разрешение: 

  • Максимально 2,048 x 2,048 пикселей.

Скорость съемки:

  • Стандарт: 30 кадров/с с разрешением 512 x 512 пикселей;
  • Высокая скорость (опционально): 60 кадров/с с разрешением 512 x 512 пикселей;
  • Сверхвысокая скорость (опционально): 100 кадров/с с разрешением 512 x 512 пикселей.

3D столик:

  • Диапазон перемещения: 50,000 x 50,000 x 75,000 мкм (XYZ);
  • Микроманипуляция: максимальное разрешение 0,2 мкм;
  • Независимое управление: по 3 осям с помощью джойстика или ПО.

4D компенсация движения:

  • Компенсация движения XY: усредненное получение изображения с компенсацией артефактов движения;
  • Компенсация движения по Z: регулировка положения образца по Z на основе изображения для долгосрочной интравитальной микроскопической визуализации и отслеживания образца (автоматическое управление столиком с обратной связью);
  • Компенсация движения T: регулировка положения XY изображения на основе изображения для долгосрочной интравитальной микроскопической визуализации и слежения за образцом (автоматическое управление каскадом с обратной связью);
  • Комбинация трех вышеперечисленных компенсаций для 4D компенсации движения in vivo.

Мониторинг и жизнеобеспечение животного:

  • Мониторинг температуры тела, управление нагревом с обратной связью через планшетный ПК;
  • 4-х канальный ректальный зонд, нагревательный элемент, термометр и нагреватель покровного стекла;
  • Система ингаляционной анестезии для грызунов.

Наборы камер для in vivo визуализации:

  • Стандартная дорсальная кожно-складчатая камера;
  • Камера для визуализации легких;
  • Краниальное окно;
  • Окно для визуализации брюшной полости;
  • Окно для визуализации поджелудочной железы;
  • Окно для визуализации молочной железы.

Отображение изображения:

  • Независимое отображение 4 одиночных каналов (RGBA-канал);
  • Комбинация всех каналов в режиме наложения (выбор между RGBA-каналом).

Режим визуализации in vivo:

  • Мозаичная визуализация (XY);
  • Z-стек (Z);
  • Time-lapse (T);
  • Time-lapse в нескольких точках (T-M);
  • Time-lapse и Z-стэк (TZ);
  • Time-lapse в нескольких точках и Z-стеком (TZ-M).
  • Краткий обзор системы IVIM:

  • Интервью с создателем компании IVIM Technology, Dr. Pilhan Kim:

 

 

 

  • Intravital longitudinal wide-area imaging of dynamic bone marrow engraftment and multilineage differentiation through nuclear- cytoplasmic labeling. 3 November 2017 / PLOS ONE;
  • Calsequestrin 2 overexpression in breast cancer increases tumorigenesis and metastasis by modulating the tumor microenvironment. 14 November 2021 / Molecular  Oncology;
  • Strategies for Targeted Delivery of Exosomes to the Brain: Advantages and Challenges. 18 March 2022 / Pharmaceutics 2022;
  • Intravital imaging and single cell transcriptomic analysis for engraftment of mesenchymal stem cells in an animal model of interstitial cystitis/bladder pain syndrome. January 2022 / Biomaterials;
  • Compact Quantum-Dot Microbeads with Sub-Nanometer Emission Linewidth. 27 August 2021 / Advanced Functional Materials;
  • Intravital Laser-scanning Two-photon and Confocal Microscopy for Biomedical Research. October 2021 / Medical Lasers; Engineering, Basic Research, and Clinical Application;
  • Oral delivery of topotecan in polymeric nanoparticles: Lymphatic distribution and pharmacokinetics. 17 May 2021 / Journal of Controlled Release;
  • Exosome-based delivery of super-repressor IkBa ameliorates kidney ischemia-reperfusion injury. 27 May 2021 / Kidney international;
  • Submicrometer perovskite plasmonic lasers at room temperature. 25 August 2021 / SCIENCE ADVANCES | RESEARCH ARTICLE;
  • Neutrophils Return to Bloodstream Through the Brain Blood Vessel After Crosstalk With Microglia During LPS-Induced Neuroinflammation. 08 December 2020 / Frontiers in Molecular Biosciences.