Система конфокальной / двухфотонной микроскопии IVM-CM3
IVM-CM3 — универсальная система конфокальной / двухфотонной интравитальной микроскопии, оптимизированная для экспериментов по визуализации in vivo.
IVM-CM3 — это прибор для интравитальной микроскопии формата «Все в одном». Он может фокусироваться на желаемой длине волны с помощью перестраиваемого блока двухфотонного лазера для длин волн в диапазоне от 690 нм до 1050 нм. IVM-CM3 сочетает в себе преимущества конфокальной и двухфотонной микроскопии, предоставляя бесконечные возможности для трехмерного изображения живых клеток вблизи кожи или в глубине опухоли у мелких животных.
Особенности:
- Полностью интегрированная система для визуализации in vivo (например, мониторинг и гомеостатическая регуляция жизнеспособности животных);
- Сверхскоростная съемка (макс. 100 кадров в секунду — 512x512 пикселей);
- 4D компенсация движения животных (X, Y, Z и время);
- Настройка длины волны лазера для оптимального двухфотонного возбуждения широкого спектра флуоресцентных агентов;
- Более глубокая визуализация тканей с помощью более длинноволновой системы фемтосекундного ИК-лазера;
- Автоматический переход одним щелчком мыши между конфокальным и двухфотонным режимами визуализации;
- Возможность двухрежимной визуализации IVM-C (конфокальная) / IVM-M (двухфотонная).
Источники:
- Типы лазеров: конфокальный лазерный блок и перестраиваемый двухфотонный Ti:Sapphire лазер;
- Длины волн конфокального блока: 405 нм (20 мВт), 488 нм (20 мВт), 561 нм (20 мВт), 640 нм (20 мВт);
- Длины волн двухфотонного лазера: 690 — 1,050 нм.
Детектор:
- Типы детекторов: конфокальный и двухфотонный детектор;
- Длины волн конфокального детектора: 185 — 900 нм (DAPI, CFP, GFP, YFP, RFP, Cy5, Cy5.5 и т.д.);
- 4 сверхширокополосных ФЭУ с высоким SNR (от УФ до ближнего ИК, сверхвысокая чувствительность, низкий темновой ток);
- Переменный диаметр пинхола: 25 — 2,000 мкм (16 шагов);
- Длина волны двухфотонного детектора: 185 — 760 нм (DAPI, CFP, GFP, YFP, RFP, Cy5, Cy5.5 и т.д.);
- 4 ФЭУ с высокой квантовой эффективностью (от УФ до ближнего ИК, сверхвысокая чувствительность, низкий темновой ток);
- 2 или 6 эмиссионных фильтров могут быть установлены на каждый из четырех детекторов.
Сканер:
- Полигональное зеркало: быстрое аксиальное сканирование, максимально 66 кГц;
- Гальванический сканер: медленное аксиальное сканирование, максимально 200 мкс/шаг).
Объективы:
- До 5 объективов (1X — 100X) могут быть установлены на моторизованную турель;
- Совместимость с коммерческими объективами.
FOV:
- От 100 x 100 мкм ² до 10 x 10 мм².
Разрешение:
- Максимально 2,048 x 2,048 пикселей.
Скорость съемки:
- Стандарт: 30 кадров/с с разрешением 512 x 512 пикселей;
- Высокая скорость (опционально): 60 кадров/с с разрешением 512 x 512 пикселей;
- Сверхвысокая скорость (опционально): 100 кадров/с с разрешением 512 x 512 пикселей.
3D столик:
- Диапазон перемещения: 50,000 x 50,000 x 75,000 мкм (XYZ);
- Микроманипуляция: максимальное разрешение 0,2 мкм;
- Независимое управление: по 3 осям с помощью джойстика или ПО.
4D компенсация движения:
- Компенсация движения XY: усредненное получение изображения с компенсацией артефактов движения;
- Компенсация движения по Z: регулировка положения образца по Z на основе изображения для долгосрочной интравитальной микроскопической визуализации и отслеживания образца (автоматическое управление столиком с обратной связью);
- Компенсация движения T: регулировка положения XY изображения на основе изображения для долгосрочной интравитальной микроскопической визуализации и слежения за образцом (автоматическое управление каскадом с обратной связью);
- Комбинация трех вышеперечисленных компенсаций для 4D компенсации движения in vivo.
Мониторинг и жизнеобеспечение животного:
- Мониторинг температуры тела, управление нагревом с обратной связью через планшетный ПК;
- 4-х канальный ректальный зонд, нагревательный элемент, термометр и нагреватель покровного стекла;
- Система ингаляционной анестезии для грызунов.
Наборы камер для in vivo визуализации:
- Стандартная дорсальная кожно-складчатая камера;
- Камера для визуализации легких;
- Краниальное окно;
- Окно для визуализации брюшной полости;
- Окно для визуализации поджелудочной железы;
- Окно для визуализации молочной железы.
Отображение изображения:
- Независимое отображение 4 одиночных каналов (RGBA-канал);
- Комбинация всех каналов в режиме наложения (выбор между RGBA-каналом).
Режим визуализации in vivo:
- Мозаичная визуализация (XY);
- Z-стек (Z);
- Time-lapse (T);
- Time-lapse в нескольких точках (T-M);
- Time-lapse и Z-стэк (TZ);
- Time-lapse в нескольких точках и Z-стеком (TZ-M).
- Краткий обзор системы IVIM:
- Интервью с создателем компании IVIM Technology, Dr. Pilhan Kim:
- Intravital longitudinal wide-area imaging of dynamic bone marrow engraftment and multilineage differentiation through nuclear- cytoplasmic labeling. 3 November 2017 / PLOS ONE;
- Calsequestrin 2 overexpression in breast cancer increases tumorigenesis and metastasis by modulating the tumor microenvironment. 14 November 2021 / Molecular Oncology;
- Strategies for Targeted Delivery of Exosomes to the Brain: Advantages and Challenges. 18 March 2022 / Pharmaceutics 2022;
- Intravital imaging and single cell transcriptomic analysis for engraftment of mesenchymal stem cells in an animal model of interstitial cystitis/bladder pain syndrome. January 2022 / Biomaterials;
- Compact Quantum-Dot Microbeads with Sub-Nanometer Emission Linewidth. 27 August 2021 / Advanced Functional Materials;
- Intravital Laser-scanning Two-photon and Confocal Microscopy for Biomedical Research. October 2021 / Medical Lasers; Engineering, Basic Research, and Clinical Application;
- Oral delivery of topotecan in polymeric nanoparticles: Lymphatic distribution and pharmacokinetics. 17 May 2021 / Journal of Controlled Release;
- Exosome-based delivery of super-repressor IkBa ameliorates kidney ischemia-reperfusion injury. 27 May 2021 / Kidney international;
- Submicrometer perovskite plasmonic lasers at room temperature. 25 August 2021 / SCIENCE ADVANCES | RESEARCH ARTICLE;
- Neutrophils Return to Bloodstream Through the Brain Blood Vessel After Crosstalk With Microglia During LPS-Induced Neuroinflammation. 08 December 2020 / Frontiers in Molecular Biosciences.
