Система конфокальной / двухфотонной микроскопии IVM-CM3

Система конфокальной / двухфотонной микроскопии IVM-CM (IVIM Technology)

IVM-CM3 — универсальная система конфокальной / двухфотонной интравитальной микроскопии, оптимизированная для экспериментов по визуализации in vivo.



IVM-CM3 — это прибор для интравитальной микроскопии формата «Все в одном». Он может фокусироваться на желаемой длине волны с помощью перестраиваемого блока двухфотонного лазера для длин волн в диапазоне от 690 нм до 1050 нм. IVM-CM3 сочетает в себе преимущества конфокальной и двухфотонной микроскопии, предоставляя бесконечные возможности для трехмерного изображения живых клеток вблизи кожи или в глубине опухоли у мелких животных.

Особенности:

  • Полностью интегрированная система для визуализации in vivo (например, мониторинг и гомеостатическая регуляция жизнеспособности животных);
  • Сверхскоростная съемка (макс. 100 кадров в секунду — 512x512 пикселей);
  • 4D компенсация движения животных (X, Y, Z и время);
  • Настройка длины волны лазера для оптимального двухфотонного возбуждения широкого спектра флуоресцентных агентов;
  • Более глубокая визуализация тканей с помощью более длинноволновой системы фемтосекундного ИК-лазера;
  • Автоматический переход одним щелчком мыши между конфокальным и двухфотонным режимами визуализации;
  • Возможность двухрежимной визуализации IVM-C (конфокальная) / IVM-M (двухфотонная).

Интервью с создателем компании IVIM Technology, Dr. Pilhan Kim:

 

Источники

  • Типы лазеров: конфокальный лазерный блок и перестраиваемый двухфотонный Ti:Sapphire лазер
  • Длины волн конфокального блока: 405 нм (20 мВт), 488 нм (20 мВт), 561 нм (20 мВт), 640 нм (20 мВт)
  • Длины волн двухфотонного лазера: 690 — 1,050 нм

Детектор

  • Типы детекторов: конфокальный и двухфотонный детектор 
  • Длины волн конфокального детектора: 185 — 900 нм (DAPI, CFP, GFP, YFP, RFP, Cy5, Cy5.5 и т.д.)
  • 4 сверхширокополосных ФЭУ с высоким SNR (от УФ до ближнего ИК, сверхвысокая чувствительность, низкий темновой ток)
  • Переменный диаметр пинхола 25 — 2,000 мкм (16 шагов)
  • Длина волны двухфотонного детектора: 185 — 760 нм (DAPI, CFP, GFP, YFP, RFP, Cy5, Cy5.5 и т.д.)
  • 4 ФЭУ с высокой квантовой эффективностью (от УФ до ближнего ИК, сверхвысокая чувствительность, низкий темновой ток)
  • 2 или 6 эмиссионных фильтров могут быть установлены на каждый из четырех детекторов

Сканер

  • Полигональное зеркало (быстрое аксиальное сканирование, макс. 66 кГц)
  • Гальванический сканер (медленное аксиальное сканирование, макс. 200 мкс/шаг)

Объективы

  • До 5 объективов (1X — 100X) могут быть установлены на моторизованную турель
  • Совместимость с коммерческими объективами

FOV: От 100 x 100 мкм ² до 10 x 10 мм²

Разрешение: Макс. 2,048 x 2,048 пикселей

Скорость съемки

  • Стандарт: 30 кадров/с с разрешением 512 x 512 пикселей
  • (Опционально) Высокая скорость : 60 кадров/с с разрешением 512 x 512 пикселей
  • (Опционально) Сверхвысокая скорость: 100 кадров/с с разрешением 512 x 512 пикселей

3D столик

  • Диапазон перемещения: 50,000 x 50,000 x 75,000 мкм (XYZ)
  • Микроманипуляция (макс. разрешение 0,2 мкм)
  • Независимое управление по 3 осям с помощью джойстика или ПО

4D компенсация движения

  • Компенсация движения XY: усредненное получение изображения с компенсацией артефактов движения
  • Компенсация движения по Z: Регулировка положения образца на основе изображения по оси Z  при длительных экспериментах и для отслеживания образца (автоматическая корректировка с обратной связью)
  • Компенсация движения T: Регулировка положения изображения по осям XY изображения на основе изображения при длительных экспериментах и для отслеживания образца (автоматическая корректировка с обратной связью)
  • Комбинация трех вышеперечисленных методов для 4D компенсации движения in vivo

Мониторинг и жизнеобеспечение животного

  • Мониторинг температуры тела, управление нагревом с обратной связью через планшетный ПК
  • 4-х канальный ректальный зонд, нагревательный элемент, термометр и нагреватель покровного стекла
  • Система ингаляционной анестезии для грызунов

Наборы камер для in vivo визуализации

  • Стандартная дорсальная кожно-складчатая камера
  • Камера для визуализации легких
  • Краниальное окно
  • Окно для визуализации брюшной полости
  • Окно для визуализации поджелудочной железы
  • Окно для визуализации молочной железы

Отображение изображения

  • Независимое отображение 4 одиночных каналов (RGBA-канал)
  • Комбинация всех каналов в режиме наложения (выбор между RGBA-каналом)

Режим визуализации in vivo

  • Мозаичная визуализация (XY)
  • Z-стек (Z)
  • Time-lapse (T)
  • Time-lapse в нескольких точках (T-M)
  • Time-lapse и Z-стэк (TZ)
  • Time-lapse в нескольких точках и Z-стеком (TZ-M)

Intravital longitudinal wide-area imaging of dynamic bone marrow engraftment and multilineage differentiation through nuclear- cytoplasmic labeling

3 November 2017 / PLOS ONE

Calsequestrin 2 overexpression in breast cancer increases tumorigenesis and metastasis by modulating the tumor microenvironment

14 November 2021 / Molecular  Oncology

Strategies for Targeted Delivery of Exosomes to the Brain: Advantages and Challenges

18 March 2022 / Pharmaceutics 2022

Intravital imaging and single cell transcriptomic analysis for engraftment of mesenchymal stem cells in an animal model of interstitial cystitis/bladder pain syndrome

January 2022 / Biomaterials

Compact Quantum-Dot Microbeads with Sub-Nanometer Emission Linewidth

27 August 2021 / Advanced Functional Materials 

Intravital Laser-scanning Two-photon and Confocal Microscopy for Biomedical Research

October 2021 / Medical Lasers; Engineering, Basic Research, and Clinical Application

Oral delivery of topotecan in polymeric nanoparticles: Lymphatic distribution and pharmacokinetics

17 May 2021 / Journal of Controlled Release

Exosome-based delivery of super-repressor IkBa ameliorates kidney ischemia-reperfusion injury

27 May 2021 / Kidney international

Submicrometer perovskite plasmonic lasers at room temperature

25 August 2021 / SCIENCE ADVANCES | RESEARCH ARTICLE

Neutrophils Return to Bloodstream Through the Brain Blood Vessel After Crosstalk With Microglia During LPS-Induced Neuroinflammation

08 December 2020 / Frontiers in Molecular Biosciences