Система экспресс-анализа качества белков Nanotemper Tycho NT.6

Nanotemper — системы для анализа структуры и взаимодействий биомолекул, купить оборудование Nanotemper в Техноинфо Система экспресс-анализа качества белков Nanotemper Tycho NT.6 купить в Техноинфо

Система экспресс-анализа качества белков на основе технологии nanoDSF.



Определяет качество, сходство и функциональность белка за 3 минуты с использованием нескольких мл образца с Tycho NT.6. Сделайте Ваши процессы разработки, анализа и очистки белка более эффективными.

Определяет, какие партии, буферы или условия являются лучшими, сравнивая стабильность и сходство каждого образца на каждом этапе эксперимента. Следит за температурными перепадами (Ti) или результатом денатурации - важными показателями стабильности белка. 

На выходе вы получите ценную информацию о функциональности, чистоте, концентрации и даже сходстве вашего белка с предыдущими партиями, используя всего 10 микролитров образца за один эксперимент.

Система Tycho NT.6 представляет собой дифференциальный сканирующий флуориметр, который измеряет флуоресценцию собственных остатков тирозина и триптофана в образцах (пептидов/белков). Полученные данные важны при проверке экспрессии, очистки и определении функций белков, изменение внутренней флуоресценции контролируется в диапазоне температур от 35 до 95 °С.

Полученные в результате данные могут быть использованы для сравнения экспериментальных партий образцов, анализа фракций во время очистки пептидов/белков, для определения надлежащих условий хранения/анализа и функциональности (то есть связывания лигандов и т.д.), анализа жидких биофармацевтические препаратов, изучения стабильности белков и фолдинга.

Максимальное количество образцов за эксперимент: до 6 

Время эксперимента: 3 минуты

Измеренный объем образца: 10 мкл

Детектируемый диапазон концентраций молекул (стандартный IgG): от 0.010 до > 200 мг/мл 

Динамический диапазон концентрации молекулы в пределах одного цикла: 500-кратная разница в концентрации (стандартный IgG)

Выходные данные:

  • Температура перегиба кривой (Ti)
  • Исходное соотношение 350 нм/330 нм при 35 °C
  • Изменение соотношения 350 нм/330 нм (Δ) между 95 °C и 35 °C
  • Яркость образца

Воспроизводимость результатов Ti* (при 70 °C): 

  • Стандартное отклонение <0,15 °C
  • Относительное стандартное отклонение <0,2 %

ΔTi * для получения достоверного результата: ± 0.3 °C 

Диапазон нагрева: от 35 °C до 95 °C  

Температурный рампинг: 30 °C/мин

Точность крутизны температурной кривой: ± 0.05 °C/мин

Детекция флуоресценции: 330 ± 5 нм и 350 ± 5 нм 

Источник флуоресценции: собственная флуоресценция триптофана и/или тирозина

Размеры: 31 см Ш x 37 см В x 15 см Г 

Вес: 6.6 кг

Диапазон разбавления для точной индикации концентрации: от 0.010 до >1 мг/мл

Метод nanoDSF предлагает множество преимуществ по сравнению с традиционными методами флуориметрии. В отличие от стандартной дифференциальной сканирующей флуориметрии, nanoDSF не требует использования флуоресцентных красителей, таких как Sypro Orange.

  • Низкое потребление образца → требуется всего 10 мкл образца
  • Свободный выбор буферов для анализа → возможны также биологические жидкости, такие как сывороточный или клеточный лизат и другие добавки/детергенты
  • Очень короткое время анализа → обеспечивает высокую пропускную способность за 3 минуты
  • Оптимальное качество данных и разрешение → двойное УФ-обнаружение на длинах волн 350/330 нм
  • Широкий диапазон температур → возможен анализ от 15 °C до 95 °C
  • Не требуется маркировка → возможен непосредственный анализ
  • Широкий диапазон концентраций от 0.010 до 200 мг/мл
  • Широкий диапазон размеров молекул → от 1 кДа до 1 МДа

NanoDSF — метод нано-дифференциальной сканирующей флуориметрии, способен анализировать конформационную и коллоидную стабильность (поведение при агрегации) белков в различных термических и химических условиях. Конформационная стабильность белка описывается его средней температурой денатурации T(°C), которая является точкой, где разворачивается половина белка.

nanoDSF, Stability, Unfolding, Screening, Buffer

Техника nanoDSF детектирует внутреннюю флуоресценцию триптофана и тирозина белков на длинах волн 330/350 нм. Взаимная интенсивность пиков чувствительна к изменению конформации белка и меняется при термической денатурации. Образцы можно нагревать до любой температуры в диапазоне от 35 °С до 95 °С. Важно отметить, что для эксперимента не требуются красители и нет ограничений по использованию буфера.