Система отбора клонов Molecular Devices ClonePix2

ClonePix2 позволяет анализировать и отбирать наиболее ценные клоны клеток млекопитающих для биотерапевтических исследований, продукции антител и разработки лекарственных препаратов.



  • Клетки растут в полутвердой среде CloneMedia, образуя отдельные клональные колонии;
  • ClonePix 2 проводит быстрый скрининг тысяч клонов, увеличивая вероятность нахождения лучших из них;
  • Съемка и отбор колоний производятся в светлом поле;
  • Изображение во флуоресцентном канале показывает уровень экспрессии;
  • Объективный анализ изображений позволяет пользователю производить отбор колоний с оптимальным уровнем экспрессии, при этом исключая слабые продуценты на ранних стадиях;
  • Точный автоматический отбор колоний позволяет избежать ошибок, связанных с методом предельных разведений;
  • Пользователи систем ClonePix продемонстировали значительное повышение продуктивности и снижение стоимости методики. К примеру, время, необходимое для выработки антител, сократилось на 50%.

Данные, полученные с использованием полностью автоматизированных систем ClonePix всё чаще цитируются в научных публикациях и на конференциях. Среди компаний, применяющих ClonePix для клонирования клеток, скрининга и селекции больших объемов клеточного материала, GSK, Merck, Wyeth, Genentech, Centocor, MedImmune, UCB and Genmab.

Производство исследуемых антител:

  • ClonePix быстро детектирует высокосекретирующие клоны в популяции CHO-S клеток, трансфицированных для получения человеческих IgG;
  • ClonePix дает возможность автоматического скрининга и сбора гибридом после слияния, используя ряд методов для детекции IgG или антиген-специфичных IgG-секретирующих клонов.

Преимущества:

  • Уменьшение времени генерации моноклональных антител в 2 раза;
  • Скрининг большего числа клонов (находит больше положительных клонов);
  • Быстрая и эффективная обработка (например, выделение HAT-selected клонов из 100-500 клеток в течение 7-10 дней);
  • Экономия времени и ресурсов;
  • In situ скрининг антигенной специфичности и секреции IgG (идентификация положительных клонов на ранних стадиях для уменьшения ненужной работы с негативными клонами);
  • Возможность получения продукта от нестабильных клонов.

Заключение от MedImmune:

  • ClonePix — это мощный инструмент для получения клеточных линий. Этот метод делает отбор высокоактивных продуцентов быстрым и менее трудоемким, сокращая время получения клеточных линий.

Стабилизация клеточных линий:

  • Отсутствие стабильности может быть проблемой на ранних стадиях трансфекции. ClonePix способен быстро определять клеточную стабильность;
  • ClonePix может переносить аликвоты выбранных клонов на полутвердую среду и в течение 4-7 дней следить за изменениями для сверки и сравнения уровня продуктивности дочерних клонов и/или заново отбирать субклоны в течение 7-14 дней;
  • Потенциальная нестабильность выявляется как изменения уровня флуоресценции дочерних клонов;
  • Клеточные скопления и количество клеток можно отслеживать с помощью CloneSelect Imager.

Отбор стволовых клеток:

  • Эффективное воспроизведение клонированных стволовых клеток с использованием маркеров плюрипотентности;
  • Скрининг против дифференцированных клеток;
  • Способствует исследованиям генетических модификаций – детектирует экспрессию вставленных или удаленных генов;
  • Для культуры мышиных эмбриональных стволовых клеток (mESC), воспроизведения и получения клеточных линий, высокое разрешение и селективность ClonePix позволяет отбирать наиболее плюрипотентные колонии из клонального монослоя и четко различать дифференцированные клоны от недифференцированных.

Экспрессия секретируемых клеточных белков:

  • ClonePix может изолировать колонии в зависимости от секретируемых клеткой маркеров, используя флуоресцентно меченые антитела к рецепторам и белкам на поверхности клетки. После визуализации колонии, экспрессирующие наибольшие количества желаемого белка, подвергают автоматическому отбору и переносу на 96-луночные планшеты для анализа и дальнейшего роста;
  • Способность ClonePix к многоцветному флуоресцентному анализу позволяет отбирать клоны, секретирующие несколько поверхностных белков. Сходным образом может быть детектирована экспрессия рецепторов.

Визуализация:

  • Программное обеспечение: Специализированное программное обеспечение для визуализации предустановленно на высокопроизводительном персональном компьютере, Microsoft Windows 7/10;
  • Изображение в белом свете: Проходящий свет: визуализация таких слабоконтрастных колоний, как прикрепленные монослои или небольшие суспендированные колонии; Эпи-иллюминация: в случае визуализации отобранных колоний;
  • Флуоресцентное изображение: Контролируемое программой переключение между 5 парами возбуждающих/пропускающих фильтров (рекомендации: использовать не более 3-х разных наборов фильтров для получения многоцветного изображения);
  • Отслеживание данных: Два встроенных устройства для считывания штрих-кодов позволяют отслеживать путь каждой колонии;
  • Камера: Встроенная 16-ти битная охлаждаемая CCD камера;
  • Скорость получения изображений: 6-ти луночный микропланшет: 5 мин для 2-х длин волн (стандартные условия);
  • Разрешение: Стандартное: 28 мкм; Максимальное: 1,5 мкм.

Оборудование (приборное оснащение):

  • Герметичность (защитная оболочка): Полностью заключенное в корпус рабочее пространство с классом чистоты 100, оснащенное HEPA фильтром;
  • Тип исходных планшетов: 6-ти луночные Петри-планшеты или однолуночные Петри-планшеты;
  • Тип конечных планшетов: 96-луночные Петри-планшеты;
  • Вместимость стойки для исходных планшетов: 10 x планшетов;
  • Вместимость стойки для конечных планшетов: 10 х планшетов;
  • Головка для отбора: 8х игл для отбора – каждая игла имеет независимое управление;
  • Размер захваты вающих игл: Диаметр захватывающих игл зависит от специфики объекта – F1: суспендированные клетки, F2: прикрепленные клетки;
  • Скорость захвата: Более 200 колоний в час;
  • Емкость для промывки: Емкость с этанолом для промывки, с автоматическим заполнением;
  • Жидкости системы захвата: 5-ти литровая емкость со стерильной водой, 5-ти литровая емкость для слива;
  • Сушка игл: Встроенная галогеновая станция для сушки игл;
  • Габариты прибора: 1010 мм (ширина) х 900 мм (глубина) х 1490 мм (высота);
  • Вес прибора: 350 кг.

Компрессор:

  • Компрессорная установка: чистая безмаслянная компрессорная установка с субмикронной фильтрацией;
  • Габариты: 250 мм (ширина) х 600 мм (глубина) х 750 мм (высота);
  • Вес: 60 кг;
  • Минимальное рабочее давление: 6 Бар;
  • Минимальный рабочий объем: 80 л/мин.

Сертификация:

  • Соответствует стандартам CE.