Система флуоресцентной визуализации in vivo FireflAi
FireflAi — это компактная система флуоресцентной визуализации тканей и живых объектов/грызунов.
FireflAi разработан и производится в России. Цель, которую мы преследовали при его создании — сделать прибор, доступный для покупки даже с гранта РНФ без длительных ожиданий и согласований в рамках федеральных целевых программ.
FireflAi имеет четыре канала регистрации флуоресценции, включая ближний ИК, LED-источники света, широкий выбор фильтров и CMOS-камеру. Это позволяет использовать широкий ассортимент флуоресцентных меток вплоть до ICG. Кроме того, есть возможность съемки в светлом поле, что удобно для навигации. Благодаря компактным размерам прибор не требует подготовки помещения и не имеет специфических требований к установке и обслуживанию. При этом поле зрения камеры позволяет исследовать до трех мышей одновременно. Прибор оборудован подогреваемым столиком и системой подвода ингаляционной анестезии.
Камера FireflAi обладает скоростью съемки до 30 к/сек, что позволяет записывать видео. Изображение отображается в режиме реального времени с оптимизацией настроек экспозиции и чувствительности камеры. Благодаря этому появляется возможность быстро получать большие серии изображений и корректировать настройки в процессе съемки. Прибор отлично подходит для первичного скрининга.
Программное обеспечение Светлячок также разработано в России и распространяется бесплатно. ПО позволяет оптимизировать настройки съемки, получать количественные данные, анализировать их и каталогизировать. Фон удаляется автоматически, настройки цвета изображения также являются гибкими (монохромное, двухцветное, многоцветное). Доступно сопоставление образцов с разными значениями экспозиции с регулировкой шкалы.
ВИЗУАЛИЗАЦИЯ ОПУХОЛЕЙ
FireflAi позволяет детектировать красители типа GFP, которые обычно используются для визуализации опухолей. Клетки с GFP вводятся в подкожные ткани,и по измерению флуоресценции можно оценить пролиферацию клеток. Этот метод позволяет отслеживать распространение метастазов, а также количественно определять и сравнивать размеры опухолей. ПО NEOimage позволяет количественно измерять изменения интенсивности сигнала во времени, а также сравнивать и анализировать числовые данные, полученные на разных образцах.
DDS (СИСТЕМА ДОСТАВКИ ЛЕКАРСТВ)
Распределение и накопление препарата в животном можно отслеживать путем последовательной съемки через определенные промежутки времени. Даже после умерщвления животного флуоресценция продолжает проявляться, что позволяет сопоставить результаты in vivo и ex vivo.
ВИЗУАЛИЗАЦИЯ МОЗГА
FireflAi позволяет визуализировать ткани мозга с использованием красителей в длинноволной области(например, mKate2 или ICG).
ТРЕКИНГ КЛЕТОК
Стволовые клетки или иммунные клетки с любыми модификациями можно визуализировать in vivo,чтобы определить их местоположение и жизнеспособность. Клетки, окрашенные флуоресцентным реагентом, можно вводить животному различными методами, такими как внутривенная, внутрибрюшинная или подкожная инъекция. Жизнеспособность клеток можно оценить с помощью количественного анализа в ПО NeoImage.
| Камера | 4/3 Color CMOS, разрешение 1400 х 1050 пикселов |
|
Скорость съемки |
до 30 кадров/с |
|
Система термостатирования |
есть |
|
Система подвода ингаляционной анестезии |
есть |
|
Каналы съемки |
синий, зеленый, красный, ИК (доступна версия для SWIR) |
|
Габариты |
260 х 260 х 400 мм |
Флуоресцентная визуализация in vivo открывает возможности неинвазивного, количественного и долговременного наблюдения за молекулярными событиями в живом организме. Этот метод позволяет исследователям отслеживать рост опухолей, воспалительные процессы, миграцию клеток и эффективность терапии в реальном времени.
В основе метода лежит регистрация флуоресцентного сигнала от специальных маркеров — экзогенных флуорофоров (например, индоцианина зеленого, ICG) или генетически кодируемых флуоресцентных белков, таких как GFP и его производные. Эти агенты избирательно накапливаются в тканях-мишенях или экспрессируются в определенных клетках, обеспечивая контраст между областью интереса и окружающими тканями.
Ключевым фактором, определяющим эффективность метода, является возможность работы в ближнем инфракрасном (БИК) диапазоне — 750–900 нм. В этой области спектра поглощение света тканевыми
хромофорами, прежде всего гемоглобином и водой, минимально, а рассеяние излучения значительно ниже, чем в видимом диапазоне. Это обеспечивает проникновение света на глубину до нескольких миллиметров и позволяет визуализировать сигналы из глубоких слоев тканей и органов, а также существенно повышает отношение сигнал / шум.
Оптическая схема прибора:
