Комплект для апгрейда конфокального микроскопа PicoQuant
Компоненты и готовые решения для апгрейда конфокального микроскопа.
Конфокальный лазерный сканирующий микроскоп можно встретить почти в любой биохимической или клеточной лаборатории или ЦКП. Возможности такого микроскопа можно существенно расширить с использованием времяразрешенных методов.
Преимущества:
- Lifetime FRET для количественных измерений эффективности FRET;
- Времяразрешенный имиджинг позволяет визуализировать такие параметры среды как концентрация ионов или pH;
- Время жизни флуоресценции не зависит от концентрации флуорофора;
- Разделение молекул с пересекающимися спектрами эмиссии по временам жизни;
- Сокращение числа необходимых детекторов - одного детектора достаточно для одновременного определения разных флуорофоров на основе их времени жизни, в том числе методом pattern matching;
- Отсечение упругого и рамановского рассеяния от флуоресценции, а также фонового сигнала по времени жизни;
- Время жизни как дополнительный параметр эксперимента повышает точность измерений.
Апгрейд представляет собой набор дополнительных компонентов для микроскопа. Они просты в использовании, универсальны и не требуют большого числа настроек.
Базовая установка включает три основных компонента: пикосекундный источник возбуждения, чувствительный к единичным фотонам детектор и устройство коррелированного по времени счета единичных фотонов (TCSPC).
Компактный комплект обновлений FLIM и FCS позволяет использовать многократные приложения с временным разрешением с лазерными сканирующими микроскопами (LSM), например:
- Time-Resolved Fluorescence;
- RapidFLIM — Redefining standards for dynamic FLIM imaging;
- Fluorescence Lifetime Imaging (FLIM);
- Phosphorescence Lifetime Imaging (PLIM);
- Fluorescence Correlation Spectroscopy (FCS);
- Fluorescence Lifetime Correlation Spectroscopy (FLCS);
- Fluorescence Cross-Correlation Spectroscopy (FCCS);
- Foerster Resonance Energy Transfer (FRET);
- Pulsed Interleaved Excitation (PIE);
- Laser Cutting/Ablation;
- Pattern Matching Analysis;
- Time-Resolved Photoluminescence (TRPL);
- TRPL Imaging;
- Antibunching;
- Anisotropy.
Система возбуждения:
- Пикосекундные диодные лазеры с частотой повторов до 80 МГц внутри компактного блока лазеров;
- Длина волны между 375 и 900 нм;
- Одно- или многоканальный лазерный драйвер;
- Опционально: внешний лазер (например сапфировый лазер);
- Пикосекундное импульсное возбуждение на 560 нм с LDH-D-TA-560.
Поддерживаемые LSM:
- Nikon: A1, C2+, C2, C1si;
- Olympus: FluoView FV3000, FVMPE-RS, FluoView FV1200 (MPE), FluoView FV1000 (MPE);
- Scientifica: VivoScope, HyperScope;
- Zeiss: LSM 980, LSM 880, LSM 780, LSM 710.
Обнаружение:
- До четырех параллельных каналов обнаружения;
- Descanned or non-descanned configuration.
- Подключение через оптические волокна к LSM.
Детекторы:
- Hybrid-Photomultiplier Tubes;
- Single Photon Avalanche Diodes;
- Photomultiplier Tubes.
Сбор данных:
- На основе метода подсчета единичных фотонов с временным коррелированием (TCSPC) в уникальном режиме с временной привязкой и временным разрешением (TTTR);
- Одновременный сбор данных до четырех каналов.
Программное обеспечение:
- SymPhoTime 64.
- Imaging specific newly synthesized proteins within cells by fluorescence resonance energy transfer Shen L., Cai L., Liu J., Zhang S., Xu J.-J., Zhang X., Chen H.-Y. Chemical Science, Vol.008, p.748-754 (2017) Reference to: LSM Upgrade Kit Related to: FLIM, FRET;
- Silver-coated nanoporous gold skeletons for fluorescence amplification Lee M.-J., Yang W.-G., Kim J.H., Hwang K., Chae W.-S. Microporous and Mesoporous Materials, Vol.237, p.60-64 (2017) Reference to: MicroTime 200, SymPhoTime Related to: FLIM;
- Intracellular fate of polymer therapeutics investigated by fluorescence lifetime imaging and fluorescence pattern analysis.
Panek J., Koziolova E., Stepanek P., Etrych T., Janouskova O. Physiological Research, Vol.065, p.217-224 (2016)
Reference to: LSM Upgrade Kit Related to: FLIM; - A comparative study of the photophysics of phenyl, thienyl, and chalcogen substituted rhodamine dyes
Sabatini R.P., Mark M. F., Mark D.J., Kryman M.W., Hill J.E., Brennessel W.W., Detty M.R., Eisenberg R., McCamant D.W. Photochemical & Photobiological Sciences, Vol.015, p.1417-1432 (2016)
Reference to: PicoHarp 300, SymPhoTime; - Mechanistic determinants of MBNL activity
Sznajder L.J., Michalak M., Taylor K., Cywoniuk P., Kabza M., Wojtkowiak-Szlachcic A., Matloka M., Konieczny P., Sobczak K. Nucleic Acids Research, Vol.044, p.10326-10342 (2016)
Reference to: LSM Upgrade Kit Related to: FLIM, FRET; - Structure and dynamics of polyelectrolyte surfactant mixtures under conditions of surfactant excess
Hoffmann I., Simon M., Farago B., Schweins R., Falus P., Holderer O., Gradzielski M. The Journal of Chemical Physics, Vol.145, 124901 (2016)
Reference to: PicoHarp 300, LSM Upgrade Kit Related to: FCS; - Investigating the DNA-binding interactions of small organic molecules utilizing ultrafast nonlinear spectroscop
Doan P. Dissertation University of Michigan (2016)
Reference to: TimeHarp 100/200, LSM Upgrade Kit Related to: FLIM; - Control of spontanous emission from quantum emitters using hyperbolic metamaterial substrates
Galfsky T. Dissertation City University of New York (2016)
Reference to: PicoHarp 300, SymPhoTime; - Improving analytical methods for protein-protein interaction through implementation of chemically inducible dimerization
Andersen T.G., Nintemann S.J., Marek M., Halkier B.A., Schulz A., Burow M. Scientific Reports, Vol.006, 27766 (2016)
Reference to: MicroTime 200, LSM Upgrade Kit, SymPhoTime Related to: FLIM, FRET; - Exploring the HYDRAtion method for loading siRNA on liposomes: the interplay between stability and biological activity in human undiluted ascites fluid
Dakwar G.R., Braeckmans K., Ceelen W., De Smedt S.C., Remaut K. Drug Delivery and Translational Research, Vol.007, p.241-251 (2016)
Reference to: LSM Upgrade Kit, SymPhoTime Related to: FCS.