Skip

Система отбора клеточных клонов ClonePix



ClonePix позволяет анализировать и отбирать наиболее ценные клоны клеток млекопитающих для биотерапевтических исследований, продукции антител и разработки лекарственных препаратов. Заказать системы отбора клеточных клонов в компании ТехноИнфо

запросить коммерческое предложение...запросить сервисную поддержку...

An established, proven solution

The single cell selection (FACS, Limiting Dilution, Leap) is now floored and clonal selection is proven, predictable, quantifiable, stable and importantly CLONAL then the CP2 is the only choice for the serious drug development team.

Systems based on ClonePix technology are now used in over 100 laboratories around the world to increase workflow productivity, leaving more time to better characterize target proteins and run new projects.

Companies such as GSK, Merck, Wyeth, Genentech, Centocor, MedImmune, UCB and Genmab have implemented ClonePix systems and data are cited increasingly in scientific conferences.
Automatically screening more clones in less time than conventional techniques, selecting cells with optimal expression levels, and picking colonies with accuracy enables scientists to:

  * Increase probability of finding optimal producers
    * Cut cell line/antibody development times – avoid limiting dilution
    * Reject poor performers at an early stage based on expression levels in situ

Introducing ClonePix 2
ClonePix™ 2 is the next generation system built on ClonePix technology and chemistries.

    * Select cells with optimal expression levels
          o Software enhancements improve ranking consistency
    * Pick colonies with accuracy and confidence
          o Robotics redesign reduces risk of colony disturbance
    * Improved workflow efficiency
          o Fewer plate handling steps

New features of ClonePix2:
1) Picking Review
2) Improved Picking Progress
3) Visualisation of whole-well images / Image thumbnails
4) Improved data analysis / Gating
5) Non-cellular discard
6) Gallery
7) Flat Field correction

Данные, полученные с использованием полностью автоматизированных систем ClonePix всё чаще цитируются в научных публикациях и на конференциях. Среди компаний, применяющих ClonePix для клонирования клеток, скрининга и селекции больших объемов клеточного материала, GSK, Merck, Wyeth, Genentech, Centocor, MedImmune, UCB and Genmab.

Производство исследуемых антител

ClonePix быстро детектирует высокосекретирующие клоны в популяции CHO-S клеток, трансфицированных для получения человеческих IgG.

ClonePix дает возможность автоматического скрининга и сбора гибридом после слияния, используя ряд методов для детекции IgG или антиген-специфичных IgG-секретирующих клонов.

Преимущества:

  1. Уменьшение времени генерации моноклональных антител в 2 раза;
  2. Скрининг большего числа клонов (находит больше положительных клонов);
  3. Быстрая и эффективная обработка (например, выделение HAT-selected клонов из 100-500 клеток в течение 7-10 дней);
  4. Экономия времени и ресурсов;
  5. In situ скрининг антигенной специфичности и секреции IgG (идентификация положительных клонов на ранних стадиях для уменьшения ненужной работы с негативными клонами);
  6. Возможность получения продукта от нестабильных клонов.

Заключение от MedImmune: ClonePix - это мощный инструмент для получения клеточных линий. Этот метод делает отбор высокоактивных продуцентов быстрым и менее трудоемким, сокращая время получения клеточных линий.

Стабилизация клеточных линий

Отсутствие стабильности может быть проблемой на ранних стадиях трансфекции. ClonePix способен быстро определять клеточную стабильность.

ClonePix может переносить аликвоты выбранных клонов на полутвердую среду и в течение 4-7 дней следить за изменениями для сверки и сравнения уровня продуктивности дочерних клонов и/или заново отбирать субклоны в течение 7-14 дней. Потенциальная нестабильность выявляется как изменения уровня флуоресценции дочерних клонов.

Клеточные скопления и количество клеток можно отслеживать с помощью CloneSelect Imager.

Отбор стволовых клеток

  • Эффективное воспроизведение клонированных стволовых клеток с использованием маркеров плюрипотентности;
  • Скрининг против дифференцированных клеток;
  • Способствует исследованиям генетических модификаций – детектирует экспрессию вставленных или удаленных генов.

Для культуры мышиных эмбриональных стволовых клеток (mESC), воспроизведения и получения клеточных линий, высокое разрешение и селективность ClonePix позволяет отбирать наиболее плюрипотентные колонии из клонального монослоя и четко различать дифференцированные клоны от недифференцированных.

Экспрессия секретируемых клеточных белков

ClonePix может изолировать колонии в зависимости от секретируемых клеткой маркеров, используя флуоресцентно меченые антитела к рецепторам и белкам на поверхности клетки. После визуализации колонии, экспрессирующие наибольшие количества желаемого белка, подвергают автоматическому отбору и переносу на 96-луночные планшеты для анализа и дальнейшего роста.

Способность ClonePix к многоцветному флуоресцентному анализу позволяет отбирать клоны, секретирующие несколько поверхностных белков. Сходным образом может быть детектирована экспрессия рецепторов.

Antibodies that identify only the active conformation of Gi family G protein subunits
FASEB J, Jun 2008; 22: 1924 - 1932.
J. Robert Lane*, David Henderson*, Ben Powney, Alan Wise, Stephen Rees, Dion Daniels, Chris Plumpton, Ian Kinghorn and Graeme Milligan*,1

Molecular Pharmacology Group, Division of Biochemistry and Molecular Biology, Institute of Biomedical and Life Sciences, University of Glasgow, Glasgow, UK; Screening and Compound Profiling, GlaxoSmithKline Research and Development, New Frontiers Science Park, Harlow, Essex, UK; and Biological Reagents and Assay Development, GlaxoSmithKline Research and Development, Medicines Research Centre, Stevenage, Herts, UK

Production of antisera able to recognize individual heterotrimeric G protein subunits resulted in rapid expansion of information on their distribution and function. However, no antibodies that specifically recognize the active state have been available. Four-way primary screening of 763 hybridomas generated from mice immunized with guanosine 5'-O-(3-thio)triphosphate-loaded Gi1 and isolated using an automated robotic colony picker identified three antibodies that interacted with the constitutively active, Q204L, mutant but neither the constitutively inactive, G203A, mutant nor wild-type Gi1. This profile extended to other closely related Gi family G proteins but not to the less closely related Gs and Gq/G11 families. Each antibody was, however, also able to identify wild-type, GDP-bound Gi family G proteins in the presence of fluoroaluminate, which mimics the presence of the terminal phosphate of GTP and hence generates an active/transition state conformation. Stimulation of cells coexpressing a wild-type Gi subunit and the dopamine D2 receptor with the agonist ligand nor-apomorphine also allowed these conformationally selective antibodies to bind the G protein. Such reagents allow the specific identification of activated G proteins in a native environment and may allow the development of label-free screening assays for G protein-coupled receptor-mediated activation of Gi family G proteins.—Lane, J. R., Henderson, D., Powney, B., Wise, A., Rees, S., Daniels, D., Plumpton, C., Kinghorn, I., Milligan, G. Antibodies that identify only the active conformation of Gi family G protein subunits.